上海润裕生物科技有限公司

15221425291

全国在线客服

技术文献

猪肌钙蛋白I(Tn-I)试剂盒使用说明书

阅读次数:744    发布时间:2017/7/31 17:15:04

猪肌钙蛋白I(Tn-I)试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:96T
9ng/L-400ng/L
使用目的:
本试剂盒用于测定猪血清、血浆及相关液体样本中肌钙蛋白I(Tn-I)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪肌钙蛋白I(Tn-I)水平。用纯化的猪肌钙蛋白
I(Tn-I)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入肌钙蛋白I(Tn-I),再
与HRP标记的肌钙蛋白I(Tn-I)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤
后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的
黄色。颜色的深浅和样品中的肌钙蛋白I(Tn-I)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸
光度(OD值),通过标准曲线计算样品中猪肌钙蛋白I(Tn-I)浓度。
猪肌钙蛋白I(Tn-I)试剂盒组成
130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶
2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(640ng/L)0.5ml×1瓶
3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶
4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份
5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张
6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
猪肌钙蛋白I(Tn-I)试剂盒操作步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
320ng/L5号标准品150µl的原倍标准品加入150µl标准品稀释液
160ng/L4号标准品150µl的5号标准品加入150µl标准品稀释液
80ng/L3号标准品150µl的4号标准品加入150µl标准品稀释液
40ng/L2号标准品150µl的3号标准品加入150µl标准品稀释液
20ng/L1号标准品150µl的2号标准品加入150µl标准品稀释液
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50µl,待测样品孔中先加样品稀释液40µl,
然后再加待测样品10µl(样品*终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此
重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50µl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50µl,再加入显色剂B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
10分钟.
10.终止:每孔加终止液50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
操作程序总结:
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的
OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,
即为样品的实际浓度。
猪肌钙蛋白I(Tn-I)试剂盒注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间
控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值
大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计
算时请*后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月
 
 

原创作者:上海润裕生物科技有限公司

相关产品

主营产品:科研ELISA试剂盒,国产ELISA试剂盒,人ELISA试剂盒,大鼠ELISA试剂盒,小鼠ELISA试剂盒,免疫因子elisa试剂盒

地址:上海    电话:15221425291    传真:    邮箱:通过本站在线发送邮件给展商

Copyright@2014-2017 上海润裕生物科技有限公司 All rights reserverd    ICP备案号:沪ICP备15043397号-1   技术支持:阿仪网    管理登录

10

阿仪网推荐收藏该企业网站